หลักการทำงานของเครื่องเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม และเทคนิคพีซีอาร์ (PCR)
วันที่เขียน 5/9/2558 17:57:23     แก้ไขล่าสุดเมื่อ 20/2/2569 4:55:55
เปิดอ่าน: 38022 ครั้ง

เครื่องเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม เป็นเครื่องมือวิทยาศาสตร์ที่มีในห้องปฏิบัติการที่ทำงานเกี่ยวข้องกับ DNA โดยเป็นเครื่องมือที่ใช้ประกอบกับเทคนิค PCR ในการเพิ่มปริมาณ DNA ขึ้นในหลอดทดลอง การรู้ถึงหลักการของเครื่องมือ วิธีการใช้งานอย่างถูกต้อง จะทำให้ผลการทดลองหรืองานวิจัยนั้นมีความน่าเชื่อถือ

เครื่องเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรม เป็นเครื่องมือวิทยาศาสตร์ที่มีในห้องปฏิบัติการที่ทำงานเกี่ยวข้องกับ DNA ลักษณะของเครื่องเหมือนหม้อหุงข้าว เมื่อเปิดฝาออกภายในมีหลุมสำหรับใส่ตัวอย่าง ขนาด 0.2 ml จำนวน 48-96 หลุม (ตามคุณสมบัติของแต่ละเครื่อง) เครื่องนี้มีความสามารถในการปรับเปลี่ยนอุณหภูมิร้อนและเย็น และในแต่ละช่วงอุณหภูมินั้นสามารถตั้งเวลาได้ การทำงานจะเปลี่ยนอุณหภูมิ ระยะเวลา ตามโปรแกรมที่ตั้งไว้ หมุนเวียนกันไปนับเป็นจำนวนรอบ โดยในช่วงอุณหภูมิและระยะเวลาที่แตกต่างกันจะส่งผลต่อตัวอย่าง DNA ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงขึ้นในหลายลักษณะ เทคนิคที่ใช้ในการเพิ่มปริมาณ DNA ขึ้นในหลอดทดลอง เรียกว่าเทคนิคพีซีอาร์ หรือ polymerase chain reaction เทคนิคนี้จะเพิ่มปริมาณ DNA ขึ้นโดยอาศัยหลักการการจำลองตัวเอง ในธรรมชาติ DNA จะอยู่เป็นสายคู่บิดเกลียววนขวา ประกอบด้วยเบส A T C และ G การเพิ่มปริมาณ DNA ในหลอดทดลองจะมี 3 ขั้นตอนคือ

1)      Denaturation เป็นการแยกสายดีเอ็นเอที่เป็นต้นแบบจากสภาพที่เป็นเส้นคู่ให้เป็นเส้นเดี่ยวโดยใช้อุณหภูมิในช่วง 92-95 องศาเซลเซียส

2)      Annealing เป็นขั้นตอนที่ลดอุณหภูมิลงอยู่ในช่วง 50-60 องศาเซลเซียส และใช้ไพรเมอร์ซึ่งเป็นดีเอ็นเอสายสั้น ๆ (ประกอบด้วยนิวคลีโอไทด์จำนวน 17-24 เบส) ที่มีลำดับเบสเป็นเข้าคู่กับสายดีเอ็นเอที่เป็นต้นแบบจับคู่กัน

3)      Extension เป็นขั้นตอนการสร้างดีเอ็นเอสายใหม่โดยสังเคราะห์ต่อจากส่วนปลายของไพรเมอร์ (ที่ใส่เข้าไปในขั้นที่สอง) ตามข้อมูลบนดีเอ็นเอที่เป็นต้นแบบแต่ละสายโดยอาศัยการทำงานของเอ็นไซม์ดีเอ็นเอโพลิเมอร์เรส (DNA polymerase) ซึ่งเอนไซม์นี้ทำงานได้ดีที่สุดที่อุณหภูมิ 72-75 องศาเซลเซียส

การทำ PCR ขั้นตอนที่ 1 ถึง 3 นับเป็นจำนวน 1 รอบ ให้ผลผลิตเป็นดีเอ็นเอสายคู่ที่มีลำดับเบสเป็นคู่สมกับดีเอ็นเอที่เป็นต้นแบบ เพิ่มขึ้นเป็นสองเท่า และเมื่อทำ PCR ขั้นตอนที่ 1 ถึง 3 หมุนเวียนไปอีกหลาย ๆ รอบ ปริมาณดีเอ็นเอจะเพิ่มขึ้นได้หลายเท่าทวีคูณ กล่าวคือปริมาณ DNA จะเพิ่มตามจำนวนรอบในการทำ PCR โดยปริมาณ DNA จะเท่า 2n เมื่อ n เท่ากับจำนวนรอบ

เทคนิค PCR นี้สามารนำไปใช้ประโยชน์ในการวิจัยด้านต่างๆ เช่นทางการแพทย์ ใช้ในการวินิจฉัยโรคต่าง ๆ ทั้งโรคติดเชื้อและโรคจากพันธุกรรม ได้แก่ การตรวจหาเชื้อไวรัสหรือแบคทีเรียที่เป็นสาเหตุของโรค ทำให้การวินิจฉัยโรคเพื่อป้องกันและรักษาเป็นไปอย่างมีประสิทธิภาพมากยิ่งขึ้น ทางการเกษตร มีประโยชน์ต่อการตรวจวินิจฉัยโรคพืช การตรวจสอบสายพันธุ์พืช นอกจากนี้แล้วเทคนิคพีซีอาร์ ยังช่วยให้เข้าใจพันธุกรรมของเชื้อโรคพืช ตลอดจนการนำไปใช้ในการป้องกันกำจัดโรคพืชที่เกิดจากเชื้อรา แบคทีเรีย และไวรัส หรือเชื้อสาเหตุโรคอื่น ๆ

ความคิดเห็นทั้งหมด (0)
ไม่มีข้อมูลตามเงื่อนไขที่ท่านกำหนด
รายการบทความการแลกเปลี่ยนเรียนรู้หมวดหมู่ : กลุ่มงานช่วยวิชาการ
รุ่งทิพย์ กาวารี » #เครื่องวิเคราะห์กรดอะมิโน (Amino Acid Analyzer - AAA) เพื่อความเข้าใจระดับพื้นฐานและการนำไปประยุกต์ใช้
การวิเคราะห์กรดอะมิโนมีความสำคัญอย่างยิ่งในงานวิจัยด้านวิทยาศาสตร์ชีวภาพ อุตสาหกรรมอาหาร การเกษตร และเภสัชกรรม เพื่อใช้ในการควบคุมคุณภาพและพัฒนาผลิตภัณฑ์ การทำงานของเครื่องวิเคราะห์กรดอะมิโน (Amino...
HPLC  เครื่องวิเคราะห์กรดอะมิโน  โปรตีน     กลุ่มงานตามสมรรถนะบุคลากร   กลุ่มงานช่วยวิชาการ
ผู้เขียน รุ่งทิพย์ กาวารี  วันที่เขียน 20/1/2569 22:48:23  แก้ไขล่าสุดเมื่อ 19/2/2569 5:29:40   เปิดอ่าน 98  ครั้ง | แสดงความคิดเห็น 0  ครั้ง
รุ่งทิพย์ กาวารี » #สรุปการเสวนา เรื่อง “อพ.สธ. กับงานวิจัย นวัตกรรม บนฐานทรัพยากรไทย : หวนดูทรัพย์สิ่งสินตน”
การเสวนาในหัวข้อ “อพ.สธ. กับงานวิจัย นวัตกรรม บนฐานทรัพยากรไทย : หวนดูทรัพย์สิ่งสินตน” จัดขึ้นเพื่อแลกเปลี่ยนมุมมอง แนวคิด และประสบการณ์ของผู้บริหารระดับสูงจากสถาบันอุดมศึกษาในภาคเหนือ ที่มีบทบาทสำ...
งานวิจัย  ฐานทรัพยากรไทย  นวัตกรรม  หวนดูทรัพย์สิ่งสินตน  อพ.สธ.     กลุ่มงานตามสมรรถนะบุคลากร   กลุ่มงานช่วยวิชาการ
ผู้เขียน รุ่งทิพย์ กาวารี  วันที่เขียน 17/1/2569 12:29:37  แก้ไขล่าสุดเมื่อ 19/2/2569 6:14:24   เปิดอ่าน 101  ครั้ง | แสดงความคิดเห็น 0  ครั้ง
พัฒนาตนเอง -นงคราญ » องค์ความรู้ความปลอดภัยทางชีวภาพและการรักษาความปลอดภัยทางชีวภาพ (Biosafety and Biosecurity) สู่การปฏิบัติงานในห้องปฏิบัติการอย่างปลอดภัย
การดำเนินงานด้านการเรียนการสอน การวิจัย และการบริการวิชาการที่เกี่ยวข้องกับเชื้อโรค สารชีวภาพ และพิษจากสัตว์ จำเป็นต้องอาศัยความรู้และความเข้าใจด้านความปลอดภัยทางชีวภาพและการรักษาความปลอดภัยทางชีวภ...
Biosafety level  Biosecurity  BSL  การรักษาความปลอดภัยทางชีวภาพ  ความปลอดภัยทางชีวภาพ  ฺBiosafety     กลุ่มงานตามสมรรถนะบุคลากร   กลุ่มงานช่วยวิชาการ
ผู้เขียน นงคราญ พงศ์ตระกุล  วันที่เขียน 24/12/2568 18:51:44  แก้ไขล่าสุดเมื่อ 18/2/2569 8:15:18   เปิดอ่าน 85  ครั้ง | แสดงความคิดเห็น 0  ครั้ง
สรุปรายงานจากการอบรม » ขั้นตอนการใช้งานอุปกรณ์และเครื่องมือในห้องปฏิบัติการ
คู่มือปฏิบัติงานฉบับนี้จัดทำขึ้นเพื่อใช้เป็นแนวทางในการใช้งานอุปกรณ์ต่าง ๆ ภายในห้องเรียนและห้องปฏิบัติการของรายวิชา 10310340/พธ340 พันธุศาสตร์เบื้องต้น โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อให้ผู้เรียนสามารถใช้อุ...
ขั้นตอนการใช้งานกล้องจุลทรรศน์     กลุ่มงานตามสมรรถนะบุคลากร   กลุ่มงานช่วยวิชาการ
ผู้เขียน วริศรา สุวรรณ  วันที่เขียน 28/9/2568 10:51:24  แก้ไขล่าสุดเมื่อ 18/2/2569 17:08:25   เปิดอ่าน 1641  ครั้ง | แสดงความคิดเห็น 0  ครั้ง